自發(fā)活動(dòng)試驗(yàn)方法學(xué)研究進(jìn)展

日期：2025-09-05 19:17

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摘要：

自發(fā)活動(dòng)試驗(yàn)是一個(gè)**神經(jīng)系統(tǒng)**藥理學(xué)評(píng)價(jià)及神經(jīng)科學(xué)學(xué)科研究的常用方法，自發(fā)活動(dòng)試驗(yàn)已經(jīng)發(fā)展成一類(lèi)可對(duì)多種動(dòng)物觀察多項(xiàng)自發(fā)活動(dòng)分類(lèi)行為指標(biāo)，并為包括**神經(jīng)系統(tǒng)**藥理學(xué)研究在內(nèi)的多種藥理學(xué)研究目的提供參數(shù)的重要方法。近年來(lái)研制的新試驗(yàn)裝置和發(fā)展的新方法具有較多優(yōu)點(diǎn)，本文簡(jiǎn)要介紹近年來(lái)鼠、豬與猴自發(fā)活動(dòng)試驗(yàn)方法學(xué)研究若干進(jìn)展。

關(guān)鍵詞自發(fā)活動(dòng)；開(kāi)場(chǎng)試驗(yàn)；**藥理學(xué)；藥理學(xué)方法

自發(fā)活動(dòng)行為測(cè)定是一些神經(jīng)科學(xué)學(xué)科研究動(dòng)物的安寧、神經(jīng)行為遺傳學(xué)及腦功能的重要參數(shù)，作為**神經(jīng)系統(tǒng)臨床前觀察**行為作用和**藥理學(xué)評(píng)價(jià)的始初篩選一般包括行為和活動(dòng)測(cè)定?；顒?dòng)行為監(jiān)測(cè)亦是觀察生存健康的主要生理指標(biāo)及研究賓主共棲生物的影響和環(huán)境因子的一種手段。因此，活動(dòng)行為監(jiān)測(cè)已經(jīng)滲透到大多數(shù)嚙鼠類(lèi)動(dòng)物廣泛范圍的各項(xiàng)研究，并已擴(kuò)大到對(duì)非人靈長(zhǎng)類(lèi)動(dòng)物等的研究，無(wú)論作為主要關(guān)注點(diǎn)還是附加方法，已涉及研究靈長(zhǎng)類(lèi)的時(shí)間生物學(xué)、營(yíng)養(yǎng)學(xué)、毒理學(xué)范疇。各種動(dòng)物有其自身的自發(fā)活動(dòng)類(lèi)型，因而測(cè)量裝置應(yīng)按動(dòng)物特點(diǎn)設(shè)計(jì)。監(jiān)測(cè)動(dòng)物行為活動(dòng)的方法有紅外線(xiàn)光束、超聲波、視頻分析、電壓金屬板、運(yùn)動(dòng)傳感器、機(jī)械振動(dòng)傳感測(cè)定、機(jī)械裝置、植入遙感勘測(cè)傳送裝置等定量活動(dòng)行為方法。抖籠法、抖籠滴水法、轉(zhuǎn)輪法、斜籠法、運(yùn)動(dòng)計(jì)量法等以往的經(jīng)典方法現(xiàn)已不常用。近年來(lái)研發(fā)的一批新裝置和發(fā)展了一批新方法具有較多優(yōu)點(diǎn)，本文簡(jiǎn)要介紹近年來(lái)自發(fā)活動(dòng)試驗(yàn)方法學(xué)研究若干進(jìn)展。

1 .小鼠自發(fā)活動(dòng)試驗(yàn)

小鼠自發(fā)活動(dòng)試驗(yàn)是應(yīng)用*廣的自發(fā)活動(dòng)行為測(cè)定方法，其中多數(shù)用紅外線(xiàn)光束法測(cè)定小鼠的自發(fā)活動(dòng)總數(shù)，或用開(kāi)場(chǎng)法人工或自動(dòng)記錄穿越格數(shù)、后腿站立次數(shù)、理毛次數(shù)、大便粒數(shù)、豎起或修飾次數(shù)(兩前肢離地1cm以上的次數(shù))、豎起或修飾時(shí)間(兩前肢離地1cm以上的時(shí)間)，但多數(shù)方法忽略呼吸、頭與尾動(dòng)作及顫動(dòng)等小的移動(dòng)。近年采用計(jì)算機(jī)視頻跟蹤系統(tǒng)能監(jiān)測(cè)垂直與水平移動(dòng)包括走動(dòng)、
跳動(dòng)和頭部活動(dòng)。

1．1 VidiomexV圖象分析法

該系統(tǒng)測(cè)定開(kāi)放場(chǎng)區(qū)的小鼠自發(fā)活動(dòng)，給藥后將小鼠單只放入墊有黑色橡膠板的開(kāi)放場(chǎng)(35 cm×30 cm×22cm)，適應(yīng)環(huán)境10min，視頻圖象顯示和圖象分析儀均由電腦操作調(diào)控完成。圖象分析系統(tǒng)自動(dòng)顯示和記錄自發(fā)活動(dòng)10min，測(cè)定參數(shù)包括走動(dòng)距離、行走時(shí)間、靜止時(shí)間和平均速度。作者用該法研究按Roth改良法給予15種不同處理組成的非預(yù)知性緊張性刺激復(fù)制的慢性應(yīng)激小鼠與正常小鼠的自發(fā)活動(dòng)，發(fā)現(xiàn)兩組參數(shù)無(wú)顯著差異。陽(yáng)性對(duì)照藥抗抑郁藥地昔帕明l5II1g·kg能使應(yīng)激小鼠的走動(dòng)距離、行走時(shí)間和平均速度縮短，而靜止時(shí)間延長(zhǎng)。提示地昔帕明對(duì)應(yīng)激動(dòng)物有**作用，而巴戟天低聚糖處理小鼠的自發(fā)活動(dòng)無(wú)顯著變化，提示該藥無(wú)興奮或**作用。

1．2 嚙鼠試驗(yàn)籠法

每個(gè)試驗(yàn)籠(40 cm×25 cm×15 em)放于12 em厚墻內(nèi)的隔音木箱中，低高二個(gè)紅外光束探頭置于離地2、8cm處，地面墊1cm厚鋸屑。
測(cè)量參數(shù)有：
① 走動(dòng)，由低位探頭測(cè)量小鼠在試驗(yàn)籠內(nèi)的水平位走動(dòng)；
②站起：由高位探頭記錄站起次數(shù)與站起所需時(shí)間的比例；
③活動(dòng)總數(shù)：連續(xù)的接觸試驗(yàn)籠的次數(shù)，即傳感器接受動(dòng)物所致試驗(yàn)籠的各種振動(dòng)如走動(dòng)、站起及搖動(dòng)、震動(dòng)、抓搔、修飾。測(cè)量時(shí)間為3個(gè)連續(xù)的20min。每鼠僅測(cè)1次活動(dòng)參數(shù)。
用該法研究出生后10～12 d小鼠，開(kāi)始給鐵劑7．5 mg·kg～，61d后同時(shí)加用安定藥氯氮平1或5mg·kg一，或安定藥氟**醇1 mg·kg一，連續(xù)3周，末次藥后24 h內(nèi)測(cè)定自發(fā)活動(dòng)，每只記錄60min，然后注射阿樸**1mg·kg 再記錄60 min。結(jié)果顯示：出生后給鐵劑可減少頭2個(gè)20分的活動(dòng)，而末20min顯示活動(dòng)增加。氯氮平5 lTlg·kg亞慢性給藥，可削弱或完全消除出生后給鐵所致頭2個(gè)20min活動(dòng)減少，削減給鐵致末20min走動(dòng)和活動(dòng)總數(shù)增高，而對(duì)站起則無(wú)作用。氟**醇亞慢性給藥對(duì)出生后不加鐵者可增加頭20min的走動(dòng)和第2個(gè)20min的站起數(shù)。氟**醇亞慢性給藥可消除出生后給鐵組頭2個(gè)20min的活動(dòng)減少，也消除出生后鐵所致末20min的活動(dòng)增加，作用大于高劑量氯氮平。出生后加鐵組給阿樸**后可增加走動(dòng)和站起，而不增加活動(dòng)總數(shù)。氯氮平1、5mg·kg亞慢性給藥降低出生后加鐵引起的走動(dòng)增加，氯氮平5lTlg·kg進(jìn)一步升高出生后給鐵引起的站起增加。氯氮平和氟**醇亞慢性給藥再給阿樸**可增加出生后賦形劑處理小鼠的走動(dòng)，而氯氮平則增加站起數(shù)。該文這種給藥后分時(shí)間段測(cè)定自發(fā)活動(dòng)數(shù)和添加工具藥的方法，有益于分析**影響自發(fā)活動(dòng)的作用特點(diǎn)]。

2 .大鼠自發(fā)活動(dòng)試驗(yàn)

2．1 開(kāi)場(chǎng)試驗(yàn)

開(kāi)場(chǎng)環(huán)境試驗(yàn)所伴有的溫和緊張性刺激對(duì)動(dòng)物是在一種新奇背景中的自發(fā)活動(dòng)行為評(píng)價(jià)。動(dòng)物在開(kāi)場(chǎng)環(huán)境的活動(dòng)是一種綜合行為，包含對(duì)新環(huán)境的恐懼、高度激勵(lì)和不斷地探查。因此，可因逃跑反應(yīng)而增加活動(dòng)或呆住反應(yīng)而減少活動(dòng)，其中包含恐懼或焦慮因素，由于動(dòng)物情緒狀態(tài)的即時(shí)調(diào)節(jié)及其自體修飾、排便和排尿等行為和生理學(xué)反應(yīng)而維持平衡。Weiss等_5報(bào)告了大鼠隔離飼養(yǎng)對(duì)開(kāi)場(chǎng)試驗(yàn)自發(fā)活動(dòng)的影響。位于實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的開(kāi)放場(chǎng)由暗灰色塑料制成的4個(gè)正方形(76．5cm×76．5cm×49cm)區(qū)域組成，12勒克司弱光照明。視頻照相機(jī)固定于4個(gè)區(qū)域的上方并傳輸?shù)奖O(jiān)控器和視頻跟蹤運(yùn)動(dòng)分析系統(tǒng)，記錄大鼠在整個(gè)場(chǎng)區(qū)的活動(dòng)行為作為總行走距離(cm)，此外，在開(kāi)場(chǎng)區(qū)設(shè)定一個(gè)虛擬的場(chǎng)區(qū)中心，大鼠在該區(qū)內(nèi)的活動(dòng)用作評(píng)價(jià)冒險(xiǎn)行為。大鼠在試驗(yàn)場(chǎng)內(nèi)適應(yīng)60min后稱(chēng)體重，逐一放入開(kāi)放場(chǎng)區(qū)中央進(jìn)行試驗(yàn)，在60min的試驗(yàn)期內(nèi)動(dòng)物分組平均地進(jìn)行。雄雌分別隔天進(jìn)行活動(dòng)計(jì)數(shù)10min，并分析試驗(yàn)期間動(dòng)物糞便存積數(shù)。大鼠分兩組，一組從21天齡起斷乳后每籠1鼠隔離飼養(yǎng)，另組每籠3～4鼠群居飼養(yǎng)。結(jié)果顯示，兩組動(dòng)物能適應(yīng)開(kāi)放場(chǎng)環(huán)境，雌鼠的移動(dòng)距離(1610．1±154．7cm)多于雄鼠(999．7±109．1cm)，但1 h內(nèi)每10min測(cè)得的分段移動(dòng)距離兩組均逐步減少。如同在整個(gè)場(chǎng)區(qū)的活動(dòng)一樣兩組動(dòng)物在中心區(qū)的活動(dòng)也顯著地逐步減少，亦以雌鼠(184．7±33．7cm)高于雄鼠(59．2±12．3cm)。群居或隔離飼養(yǎng)不影響大鼠的自主活動(dòng)。性別和群居隔離飼養(yǎng)對(duì)大鼠在整個(gè)場(chǎng)區(qū)或中央?yún)^(qū)內(nèi)的移動(dòng)距離均無(wú)相互作用。雌雄在開(kāi)放場(chǎng)環(huán)境的排便量相似，群居隔離飼養(yǎng)及性別與群居隔離飼養(yǎng)間相互作用對(duì)排便無(wú)影響。

2．2 改良開(kāi)場(chǎng)試驗(yàn)

該試驗(yàn)可結(jié)合觀察對(duì)刺激物的注意力，裝置的閉路視頻相機(jī)置于方形白色室壁開(kāi)放場(chǎng)箱(60 cm×60 em×45cm)上方50cm處，所有信號(hào)由視頻跟蹤系統(tǒng)分析并收集于電腦，試驗(yàn)時(shí)紅光照明以增強(qiáng)物體與背景的對(duì)比并減少動(dòng)物的陰影。占場(chǎng)區(qū)1／9的中心區(qū)由電腦分析器單獨(dú)監(jiān)控。試驗(yàn)開(kāi)始前將4cm×4cm×2cm固體泡沫塑料塊作為刺激物用螺絲固定放于中心區(qū)的中心。大鼠不必離室壁移動(dòng)很遠(yuǎn)而容易地穿越中心區(qū)，這種設(shè)計(jì)的基本原理是創(chuàng)造一個(gè)環(huán)境使大鼠有低而可靠的可能性進(jìn)入中心區(qū)而不管存在目標(biāo)與否。為確證進(jìn)入中心區(qū)與對(duì)刺激物的注意力有關(guān)，將動(dòng)物頭部用記號(hào)筆涂黑，使相機(jī)僅跟蹤大鼠身體的該特征。10min試驗(yàn)期間每2．5min由電腦收集資料一次，以評(píng)價(jià)參數(shù)的動(dòng)態(tài)變化。行為測(cè)量包括總移動(dòng)距離、進(jìn)入中心區(qū)的次數(shù)、持續(xù)在中心區(qū)的時(shí)間、進(jìn)入中心區(qū)平均所需時(shí)間(s／進(jìn)入)。該研究用開(kāi)放場(chǎng)試驗(yàn)延伸分析動(dòng)物對(duì)刺激目標(biāo)的反應(yīng)，而不引起活動(dòng)增高的干擾，提供了一個(gè)動(dòng)物對(duì)外界特殊刺激反應(yīng)的行為指標(biāo)，動(dòng)物在試驗(yàn)期間即使重復(fù)應(yīng)用相同的刺激物亦不降低對(duì)目標(biāo)的反應(yīng)，表明新奇不是引起探究反應(yīng)的重要因素。調(diào)節(jié)開(kāi)放場(chǎng)大小、放刺激物區(qū)域的大小與位置、刺激物的大小與成分以及試驗(yàn)期限能改變并擴(kuò)充行為測(cè)量的內(nèi)涵。如放置一個(gè)有氣味的目標(biāo)食物，然后除去食物，量化動(dòng)物對(duì)食物刺激目標(biāo)的行為反應(yīng)，可用在中心區(qū)的停留時(shí)間以評(píng)價(jià)食物刺激的不同功效和評(píng)價(jià)厭食藥的影響。同樣，與性別相關(guān)的有氣味刺激物也能用作評(píng)價(jià)**和藥理學(xué)變量對(duì)性別相關(guān)刺激反應(yīng)的影響。表明該方法對(duì)種種行為背景潛在的適用性，結(jié)合定量跟蹤動(dòng)物對(duì)特殊刺激目標(biāo)的自發(fā)行為反應(yīng)是行為神經(jīng)科學(xué)一種有適用性的方法學(xué)。

2．3 計(jì)算機(jī)圖像法評(píng)價(jià)自發(fā)活動(dòng)

嚙齒動(dòng)物活動(dòng)圖像自動(dòng)識(shí)別裝置(the rodent activity patternidentifi．cationdevice，RAPID)由觀察環(huán)境、圖像獲取硬件和軟件、圖像分析和分類(lèi)程序、資料分析程序等部件組成。觀察箱為一底長(zhǎng)52．5cmX高23．5cm的梯形樹(shù)脂玻璃箱，分成兩個(gè)等大的小室，室間壁上有6個(gè)直徑1．2cm的小孑L，以使同步試驗(yàn)的對(duì)照和處理大鼠彼此看見(jiàn)并聞到氣味，2個(gè)視頻探頭分別置于觀察箱上方與側(cè)面約1ITI處，可從2個(gè)方向觀察大鼠的任何復(fù)雜活動(dòng)。觀察室白光照明，其大小的限制取決于視頻照相機(jī)的像素，256X256像素的分辨率將適合于評(píng)價(jià)大致的活動(dòng)行為，如增加到512×512像素，則對(duì)小鼠或大鼠整體可仔細(xì)分辨，如足與尾巴的活動(dòng)亦不會(huì)遺漏。該RAPID系統(tǒng)規(guī)定的動(dòng)作分類(lèi)盡可能接近于明確的行為動(dòng)作、狀態(tài)、姿勢(shì)、面部表情、抗議和動(dòng)作趨勢(shì)。包括5個(gè)主要身體姿勢(shì)和8種修飾動(dòng)作，兩組13種動(dòng)作相互關(guān)聯(lián)而又獨(dú)立，13個(gè)“單元?jiǎng)幼鳌钡碾p元結(jié)合形成27個(gè)不同的組合動(dòng)作。5個(gè)主要身體姿勢(shì)之一和8種修飾動(dòng)作結(jié)合被定為一個(gè)組合動(dòng)作類(lèi)別，體位姿勢(shì)伴有修飾動(dòng)作時(shí)的組合動(dòng)作呈配對(duì)發(fā)生。

表1 RAPID行為動(dòng)作分類(lèi)法的行為動(dòng)作操作說(shuō)明

主要身體姿勢(shì)                     說(shuō)明
站立                   大鼠四肢著地，身體不移動(dòng)坐身體前半部抬起，身體前部和后部幾乎成直角，身體后部著地
站起                  用后腿站起，身體趨于垂直，前部抬起
行走                  大鼠四肢著地走動(dòng)
躺下                   身體腹部著地，不移動(dòng)(至少需要5個(gè)畫(huà)面)

修飾類(lèi)動(dòng)作

空白                     修飾不能識(shí)別
修飾                   嘴和足底觸及身體
頭轉(zhuǎn)動(dòng)                 頭水平移動(dòng)超過(guò)l5o
觀望                   頭向上但不針對(duì)一個(gè)目標(biāo)，身體不移動(dòng)
聞                        鼻子觀測(cè)籠壁的一個(gè)孑L
嗅                      鼻子對(duì)著一個(gè)目標(biāo)：地面或墻壁，身體不移動(dòng)
轉(zhuǎn)動(dòng)                   頭和身體水平移動(dòng)超過(guò)20~
洗臉                  前蹄在頭部挪動(dòng)

通過(guò)分析個(gè)體間的可變性、對(duì)照值的重現(xiàn)性和受試物處理效應(yīng)的穩(wěn)定性考察實(shí)驗(yàn)裝置的可靠性，發(fā)現(xiàn)RAPID系統(tǒng)行為動(dòng)作的分類(lèi)和3個(gè)經(jīng)訓(xùn)練的人工觀察者的分類(lèi)相比，統(tǒng)計(jì)兩者的Kappa值有高度一致性。人工觀察和RAPID分類(lèi)的修飾活動(dòng)如嗅和聞彼此間亦有很好一性。評(píng)價(jià)2個(gè)獨(dú)立實(shí)驗(yàn)室34只對(duì)照大鼠的變異系數(shù)，雖種系相同但并非無(wú)病原體，體重為2～3周齡，顯示主要身體姿勢(shì)動(dòng)作的出現(xiàn)率大多數(shù)在25％～35％的范圍內(nèi)。將D．***1mg·kg處理大鼠的反應(yīng)重現(xiàn)性與文獻(xiàn)值比較，3名獨(dú)立測(cè)量者的資料有明顯一致性和重性，動(dòng)物活動(dòng)數(shù)、總活動(dòng)時(shí)間和動(dòng)作的時(shí)間分布和時(shí)間次序有高度相關(guān)性。該裝置采用自動(dòng)控制可降低偏見(jiàn)和減少誤差，消除觀察者的可變性，使手續(xù)程序輕松快捷，且可長(zhǎng)久記錄觀察資料。由于近來(lái)硬件成本顯著降低，且系統(tǒng)能觀察大量動(dòng)物，同時(shí)從幾個(gè)視頻記錄器的終端得到資料，如設(shè)計(jì)15min同時(shí)觀察2只大鼠，3個(gè)終端每小時(shí)觀察6只大鼠，8h能觀察72對(duì)，并能保存和分析所有資料，因此十分經(jīng)濟(jì)和高效。

2．4 探測(cè)身體輻射熱法試驗(yàn)

Supermex系統(tǒng)用傳感器探測(cè)動(dòng)物身體輻射熱來(lái)測(cè)量活動(dòng)行為，傳感器置于透明兩烯酸鼠籠上方，兩側(cè)有一對(duì)紅外熱電探測(cè)器即站起傳感器以測(cè)量動(dòng)物站起的輻射熱，該系統(tǒng)可發(fā)現(xiàn)一個(gè)直徑6m和上方視野110。的圓錐形區(qū)域內(nèi)溫度高于背景5℃的任何目標(biāo)，每個(gè)傳感器探頭能監(jiān)測(cè)籠內(nèi)多個(gè)區(qū)域動(dòng)物在X、Y、Z軸的移動(dòng)活動(dòng)，適用于嚙齒類(lèi)小動(dòng)物或小型長(zhǎng)尾猴到大動(dòng)物犬、猴和豬等動(dòng)物，操作非常簡(jiǎn)便，靈敏度不需調(diào)節(jié)，傳感器可以固定置于鼠籠上方的天花板，一個(gè)Super．mex能任意選擇分析80個(gè)接口記錄的數(shù)據(jù)。一名操作者能同時(shí)監(jiān)控5只大鼠，自動(dòng)匯總記錄15min所得計(jì)數(shù)。用該系統(tǒng)測(cè)試發(fā)現(xiàn)促甲狀腺素釋放**和垂體腺苷酸環(huán)化酶活化多肽腦室內(nèi)給藥能劑量依賴(lài)地顯著增加自發(fā)活動(dòng)，促甲狀腺素釋放**200或4OOnmol產(chǎn)生的活動(dòng)總計(jì)數(shù)5000次，為對(duì)照的250％，垂體腺苷酸環(huán)化酶活化多肽1 mnol是對(duì)照的300％，2mnol的總計(jì)數(shù)9 000次為對(duì)照的750％，而2nmol血管活性腸肽改變自發(fā)活動(dòng)計(jì)數(shù)不顯著。站起行為因**數(shù)明顯低于自發(fā)活動(dòng)故有更大的差異性，上述肽類(lèi)所致的站起行為改變類(lèi)型類(lèi)似于自發(fā)活動(dòng)變化的類(lèi)型。促甲狀腺素釋放**和垂體腺苷酸環(huán)化酶活化多肽能劑量依賴(lài)地顯著增加活動(dòng)數(shù)，促甲狀腺素釋放**4OOnmol的站起數(shù)是對(duì)照的261％。垂體腺苷酸環(huán)化酶活化多肽1nmol增加站起數(shù)為對(duì)照的179％，2nmol增加數(shù)為對(duì)照的400％，血管活性腸肽2nmol不影響站起數(shù)。作者認(rèn)為刺激自發(fā)活動(dòng)可能是由于激活多巴胺能系統(tǒng)，而刺激站起行為可能是由于激活去甲。腎上腺素能系統(tǒng)。因此，自發(fā)活動(dòng)行為是觀察**神經(jīng)興奮劑對(duì)兒茶酚胺能系統(tǒng)效應(yīng)的一個(gè)好指標(biāo)。

3 .小型豬數(shù)字視頻跟蹤系統(tǒng)測(cè)定自發(fā)活動(dòng)

3．1 測(cè)定方法

連接數(shù)字視頻記錄器的記錄豬自發(fā)活動(dòng)的單色錄像機(jī)，能監(jiān)控整個(gè)場(chǎng)區(qū)(2m×3．15m)四角和每側(cè)墻壁的中央以獲取參數(shù)。7頭18月齡雌性小型豬于進(jìn)入研究前適應(yīng)環(huán)境6個(gè)月，用D．***處理5次以使動(dòng)物有相似的興奮程度，末次給藥在6個(gè)月前完成。試驗(yàn)開(kāi)始前1周作3個(gè)30min的場(chǎng)區(qū)環(huán)境適應(yīng)，測(cè)試10：O0～15：O0間的自發(fā)活動(dòng)。每個(gè)d3做動(dòng)物試驗(yàn)，先給賦形劑0．9％NaCl 0．2ml，隨后以0.05、0．1、0．3mg·kg。。的遞增劑量3次im鹽酸阿樸**。注射后立即引入場(chǎng)內(nèi)，靜置1h，然后視頻記錄自發(fā)活動(dòng)60min。結(jié)果表明該法有很好的可重復(fù)性，試驗(yàn)對(duì)每頭豬跟蹤10rain，7頭豬跟蹤兩次的平均移動(dòng)距離是29．6±9．6m，平均誤差是0．10±0．02 m，可重復(fù)性系數(shù)0．6％，表明該方法有高的可重復(fù)性。

3．2 **性評(píng)價(jià)

為了評(píng)價(jià)基礎(chǔ)干擾水平對(duì)**性的影響，將一只大約與豬相同大小和顏色(淺米色)的箱子(30cm×47em)作為一個(gè)固定目標(biāo)放在開(kāi)放場(chǎng)并“跟蹤”10rain，用計(jì)算機(jī)從該箱記錄的移動(dòng)距離估計(jì)計(jì)算方法的**性，結(jié)果顯示對(duì)該目標(biāo)記錄的誤差僅一個(gè)像素，估計(jì)移動(dòng)距離為2m。試驗(yàn)10min內(nèi)對(duì)照的平均移動(dòng)距離為42 4-17 m，能增加豬活動(dòng)的阿樸**0．05 mg·kg作陽(yáng)性對(duì)照為157±46m，誤差大小與豬的總移動(dòng)距離有關(guān)，約相當(dāng)于移動(dòng)距離預(yù)計(jì)誤差的1％～5％，表明該方法有很高的**性。

3．3 方法學(xué)評(píng)價(jià)

用轉(zhuǎn)盤(pán)法估計(jì)對(duì)移動(dòng)目標(biāo)跟蹤過(guò)程的**性，在距平均轉(zhuǎn)速0．02 m·s 的黑色圓盤(pán)(直徑34 cm)中心14cm處放一15lllln的白點(diǎn)，用跟蹤軟件估計(jì)的距離與白點(diǎn)移動(dòng)的實(shí)際距離比較，白點(diǎn)準(zhǔn)確移動(dòng)二輪的計(jì)算值表示實(shí)際距離的百分比。結(jié)果表明，跟蹤轉(zhuǎn)盤(pán)上的移動(dòng)白點(diǎn)的軌跡與跟蹤系統(tǒng)所記錄的實(shí)際軌道有很好的一致性。該點(diǎn)移動(dòng)距離的實(shí)際計(jì)算值是176cm，而跟蹤軟件估計(jì)的移動(dòng)距離是192cm,，跟蹤系統(tǒng)高估移動(dòng)距離9％。這種偏差主要是由于偏離標(biāo)準(zhǔn)的像素大小。跟蹤系統(tǒng)識(shí)別該點(diǎn)是離轉(zhuǎn)盤(pán)中心的距離不是14cm而是15．2cm，這相當(dāng)于移動(dòng)距離191cm，非常接近于跟蹤運(yùn)算得到的估計(jì)移動(dòng)距離(192em)，因此跟蹤軟件在估計(jì)移動(dòng)距離時(shí)的偏差主要來(lái)自鏡頭扭曲，引起像素大小偏離標(biāo)準(zhǔn)所致。該方法通過(guò)增強(qiáng)動(dòng)物和背景間的對(duì)比，以提高跟蹤動(dòng)物的**性，并克服了手工記錄容易疲勞、漏記及帶主觀性等缺點(diǎn)。并證明豬尾巴擺動(dòng)不影響移動(dòng)距離測(cè)量的**性。在可控條件下未發(fā)現(xiàn)豬在開(kāi)放場(chǎng)的中心區(qū)與周邊區(qū)有任何區(qū)域空間偏愛(ài)，表明健康豬探測(cè)一個(gè)熟悉的區(qū)域無(wú)空間偏愛(ài)。而大鼠則不同于豬，有沿墻壁行走維持鼻毛與墻壁接觸的不對(duì)稱(chēng)活動(dòng)行為。

4 .小型長(zhǎng)尾猴袖珍型活動(dòng)掛表法模型

用于電腦遙控監(jiān)測(cè)飼養(yǎng)條件下猴行為活動(dòng)的袖珍型活動(dòng)掛表為帶有32kb內(nèi)存包有圓柱形外套的壓電加速計(jì)，猴戴掛合適的活動(dòng)掛表項(xiàng)圈后能很好耐受，約5min后便不再理睬。該裝置可以綜合各個(gè)方向動(dòng)作的強(qiáng)度、數(shù)量和持續(xù)時(shí)間，能測(cè)出大于0．5g作用力的活動(dòng)。實(shí)驗(yàn)前24h將該裝置掛于動(dòng)物的頸項(xiàng)，每天定時(shí)測(cè)定15min，連續(xù)14d。試驗(yàn)分配對(duì)組8只猴(雄性切除輸精管)飼養(yǎng)于4只籠內(nèi)與群居組8只單一性別猴飼養(yǎng)于有管道相連的二只籠內(nèi)，地面上方1m處有400勒克斯照明，12h的明暗周期。該法的顯著優(yōu)點(diǎn)是可以實(shí)時(shí)非侵害性地監(jiān)測(cè)群聚在單個(gè)測(cè)試區(qū)域內(nèi)的多只動(dòng)物的自發(fā)活動(dòng)，并便利地以*小干擾監(jiān)測(cè)動(dòng)物在居籠內(nèi)的一種關(guān)鍵行為指標(biāo)，而不用改變動(dòng)物生活環(huán)境。這種在居籠內(nèi)的行為和生理學(xué)監(jiān)測(cè)，因?yàn)楸３謩?dòng)物的平靜，而具有科學(xué)的正確性和實(shí)用性¨。。。

5 .結(jié)語(yǔ)

自發(fā)活動(dòng)方法學(xué)研究的新進(jìn)展表明，自發(fā)活動(dòng)試驗(yàn)已經(jīng)發(fā)展成一類(lèi)可對(duì)多種動(dòng)物觀察多項(xiàng)自發(fā)活動(dòng)分類(lèi)行為指標(biāo)，并為包括**神經(jīng)系統(tǒng)**藥理學(xué)研究在內(nèi)的多種藥理學(xué)研究目的提供參數(shù)的重要方法。多種多樣的自動(dòng)化視頻跟蹤實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備與**定量的測(cè)量指標(biāo)已取代肉眼目測(cè)、手工記錄、裝置簡(jiǎn)易與觀察指標(biāo)不多的傳統(tǒng)方法。上述新近發(fā)展的自發(fā)活動(dòng)試驗(yàn)方法給我們帶來(lái)許多值得重視的啟示：實(shí)驗(yàn)環(huán)境應(yīng)適合動(dòng)物習(xí)性，活動(dòng)室所用建筑材料與色澤、活動(dòng)區(qū)大小、環(huán)境隔音、光照強(qiáng)度、對(duì)環(huán)境的性別差異、觀察持續(xù)時(shí)間與間隔選擇等對(duì)不同的動(dòng)物均應(yīng)有不同的要求，否則可能會(huì)影響動(dòng)物本能的自發(fā)活動(dòng)的真實(shí)性。不同動(dòng)物應(yīng)觀察其自身特有的自發(fā)活動(dòng)行為，如小鼠自發(fā)活動(dòng)的方式有走動(dòng)、前肢上舉、抓搔、洗臉、舐足、嗅聞、咬等，大鼠、豬、猴亦均有自身的自發(fā)活動(dòng)特點(diǎn)及自發(fā)活動(dòng)晝夜時(shí)辰與日間分布規(guī)律，因此應(yīng)設(shè)計(jì)不同的觀察指標(biāo)在不同的時(shí)間作觀察，并應(yīng)盡可能在動(dòng)物處于生理狀況下取得不受人為干擾的真實(shí)原始數(shù)據(jù)。分類(lèi)測(cè)定自發(fā)活動(dòng)行為的各個(gè)單元?jiǎng)幼?，可區(qū)分**作用的特點(diǎn)。分析**對(duì)自發(fā)活動(dòng)試驗(yàn)中走動(dòng)、站起等不同指標(biāo)的影響可以探討**作用的機(jī)理，有作者認(rèn)為刺激自發(fā)活動(dòng)總數(shù)可能是由于激活多巴胺能系統(tǒng)，而刺激站起行為可能是由于激活去甲腎上腺素能系統(tǒng)。因此，自發(fā)活動(dòng)行為是觀察**神經(jīng)興奮劑對(duì)兒茶酚胺能系統(tǒng)效應(yīng)的一個(gè)好指標(biāo)。
根據(jù)**特點(diǎn)在自發(fā)活動(dòng)試驗(yàn)中添加目標(biāo)刺激物、氣味或性別特異性等目的刺激物，在觀察自發(fā)活動(dòng)的同時(shí)觀察動(dòng)物對(duì)這些刺激物的注意力，或許可以發(fā)現(xiàn)**新的藥理作用。藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)研究是藥理學(xué)的重要組成，研究方法的改進(jìn)與**將會(huì)推動(dòng)藥理學(xué)科的發(fā)展，因此也應(yīng)該是藥理學(xué)者研究的重要內(nèi)容，從本文簡(jiǎn)述的自發(fā)活動(dòng)試驗(yàn)方法學(xué)研究若干進(jìn)展，提示被認(rèn)為十分簡(jiǎn)單的自發(fā)活動(dòng)試驗(yàn)方法也是大有研究?jī)r(jià)值的，藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)研究應(yīng)該成為藥理學(xué)工作者共同關(guān)注的藥理學(xué)分枝學(xué)科。
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　摘自＜中國(guó)臨床藥理學(xué)與**學(xué)＞

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